电子显微镜下环状寡聚体结构类似于天然内质网膜
以碘离子为疏水性碰撞荧光猝灭剂,证实新生肽在转运过程中经过
一个穿过膜的水孔。碘离子位于内质网膜腔一侧,而不是胞质一侧,因
此可以碰撞到并猝灭位于膜胞质一侧核糖体内的荧光染料。这个结果表
明,存在一条水质通道使腔内的碘离子可以完全通过内质网膜并扩散进
入核糖体。碰撞猝灭实验还证明,核糖体中的水质新生肽链通道和内质
网膜中的水质孔在核糖体结合到膜上的都被封闭与胞质隔绝。荧光实验
结果综合表明,新生肽链在转运过程中处于一种水质环境中,这种水质
空间只与新生分泌蛋白的目的地内质网腔连通。较近,利用电子显微镜
对纯化的膜蛋白进行观察,已发现一个水质转运孔的图像。一些在光交
联研究中参与转运的蛋白质被纯化,发现它们形成了一种环状的寡聚体
,结构类似于在电子显微镜下观察到的天然内质网膜。随后用冰冻蚀刻
显微技术得到的复合体与核糖体结合的照片证明,新生肽经过的水质孔
与核糖体通道对齐。由未进行翻译时的核糖体和纯化的Sec61形成异源
二聚复合体,利用冰冻蚀刻电子显微照片构建出此异源二聚复合体的三
维结构。
与荧光实验得到的数据一致,核糖体与转运孔结合形成一个独立封
闭的管道,这个管道从核糖体中蛋白质合成的位置到达分泌蛋白的目的
地——内质网腔。
因此,在共翻译转运过程中,核糖体结合到内质网膜上的特定位点
,它们是水孔穿越膜双分子层的地方。在蛋白质合成的过程中,新生多
肽链通过这些孔穿过内质网膜进入到内质网腔。