培养基凝固菌块样品移植在玻璃环中培养观察显微镜
细菌的排除方法
在分离培养的过程中,常会有细菌混入造成污染,怎样排除这
些细菌,是研究工作中经常遇到的问题。
1.使用酸性培养基 为使培养基达到酸性,常使用盐酸、磷酸
和乳酸。事先应按所需pH值的酸浓度和用量计算好应加入酸的数
量,在向培养皿中分注培养基之前就将酸混合。~般要求培养基pH
值为4—5。例如酸性马铃薯琼脂就是在临用时在每个培养皿中加入
25%的乳酸两滴,再倒入培养基混合而成。
2.使用含抑菌物质的选择性培养基 为了抑制细菌,在培养基
中常加入青霉素+链霉素、氯霉素、庆大霉素、牛胆粉(oxgall)、孟
加拉红或龙胆紫等;为抑制其他非目标真菌,则常加入~定数量的
放线菌酮(环己酰亚胺)、五氯硝基苯(PCNB)、多果定(Dodine)、
碱式硫酸铜、摩洛杀(Morocide)等。一般抗菌物质(如上述染料)
和杀菌剂等可以与其他营养物质同时加入培养基,然后灭菌,但各
种抗菌素则是用细菌过滤器除菌,然后再加入已灭菌的熔化培养基
中备用。
3.使用玻璃环 在灭菌的培养皿中先加入部分培养基使之凝
固,在中部放上玻璃环后再加足培养基使玻璃环的下部埋在培养基
中,培养基凝固后将污染的菌块移植在玻璃环中间进行培养。真菌
菌丝就能从玻璃环之下穿过培养基生长出来,获得不带细菌的菌丝
。