不同菌株所使用的培养基及培养方法都不同-细菌显微镜
真菌的保藏是要把培养条件与培养时间调节至细胞不过度增殖
的程度,使繁殖的细胞原样地转入休眠状态,为此采用隔绝空气、降
低温度、或使之处于干燥状态的方法。在保藏过程中,为使菌种不
发生变异,以保存遗传纯种(纯系)为好,因此应尽量保存单孢子
或单菌丝分离菌株。还必须了解对不同菌株的适当或不适当的培养
基,适当或不适当的培养方法;而对新分离的菌株要采用其近缘种
所使用的培养基及培养方法。
保藏用培养基的选择原则:①一般认为营养稀薄的培养基保存
效果更好一些。真菌在自然条件下很少遇到糖分很多的条件,在含
糖的培养基上,条件过于优越,较初生长很快,但移植几次往往就
退化,不再形成孢子。因此,保存菌种较好不用或少用糖,特别是
单糖。②在该培养基上应容易形成孢子。半知菌的分生孢子是传播
单元,也是休眠体,易于保存。然而虫霉的分生孢子寿命短,只能
短期保存,但休眠孢子可长期保存达数年之久。⑧能利用无机氮者
就不要使用有机氮源;不需维生亲而能生长的微生物可使用合成培
养基。④对生理缺陷型菌株,培养基中应含有缺陷物质;耐药物菌
株,培养基中应含这种药物。⑤萨氏(葡萄糖4%,蛋白胨1%,琼
脂1.5%)培养基去掉葡萄糖成分,历来作为大多数病原性真菌的保
存培养基而广泛应用。这种培养基去掉葡萄糖是为了防止发生变异;
但某些菌种可能会发育不佳,容易死亡。因此,可使用加1%葡萄糖
的萨氏培养基。此外PDA培养基和察氏培养基也常被选用。
菌龄在菌种的保藏中也很重要,得到健壮的菌丝细胞和孢子之
后才有利于长期保存,通常是培养4—7天后保藏。白僵菌和拟青霉
等生长缓慢,往往需要培养10一14天。