荧光显微镜术及其在生物标本成像方面的应用
显微镜术
显微镜的使用方法,包括光学显微镜术在不同用途下的使用原
理,如相差、差分干涉相差(DIC)及荧光显微镜术,不同用途显微
镜的校正与调整,标本的制备与标记,以及精确成像的方法。
随着摄像机、数码相机及电子成像技术的发展,使用显微镜观
察微细结构的技术也在不断改进,而成像质量及精确度主要取决于
显微镜的校正与调整。
科研型显微镜的亮视场、相差及表面荧光显微镜术的校正方法
。
为何校正与调整显微镜对于获得较佳成像质量及精确的数值测量
至关重要。也讲述了Kohler照明学的原理,为探讨影像形成及用于
亮视场与相差成像的显微镜校正打下基础。相机的连接方法、影像
形成的校准方法、显微镜的维护与清洁方法,以及显微镜性能的评
估方法。
荧光显微镜术及其在生物标本成像方面的应用。荧光显微镜术
很早就已用于观察细胞结构,其原理在于荧光分子能吸收特定波长
的光,然后发出更长波长的光。如何选择波长选择装置及物镜、如
何使荧光标本成像及如何获得较佳亮度与较佳分辨率。近年来,由
于通过经济型相机与荧光显微镜获得数字化图像的收集、存储及分
析软件的出现,数字化分析技术已成为图像档案管理的较佳选择,
逐渐取代了传统的成像技术,该内容在本单元“数字化暗室”中有
所阐述,并谈到与传统成像技术相比,数字化成像技术的优点。