荧光成像技术即荧光斑点显微镜术(FSM)的应用
一种荧光成像技术，即荧光斑点显微镜术(FSM)，该技术用于
观察肌动蛋白与微管蛋白等细胞内蛋白复合物的动力学、运转及更
新。该技术原理在于向大分子结构内注射入低浓度的荧光亚单位，
它与未被荧光标记的内源性亚单位共同装备蛋白质，这样就可在分
辨率有限的荧光图像中观察到感兴趣的结构内的荧光斑点排布。荧
光斑点排布的改变可用于定量分析结构的组装、拆解及运动。与传
统的荧光成像技术相比，该技术大大减少了离焦荧光，所以荧光标
记结构的荧光斑点大大增强了。此外，与仅可检测小范围标记部分
的光敏化和光漂白技术相比，FSM则可检测整个细胞内的蛋白质动
力学。作为该技术有用性的例证，采用FSM技术研究活细胞内微管
蛋白与肌动蛋白细胞骨架的动态变化的方法，并详述了荧光标记微
管蛋白与肌动蛋白的方法及延时成像技术。
近年来，以水母(Aequoria victoria)的绿色荧光蛋白作为探
针来研究活细胞甚至活体内的特定蛋白质的技术在逐步发展。绿色
荧光蛋白(GFP)及其基因变异体，并举例说明如何用GFP来研究活细
胞内特定的GFP融合蛋白的定位及迁移。
光学显微镜的校准及调节
本单元讲述经典的研究型复合光学显微镜以透射及反射照明成
像模式工作时校准与调节的方法，而这两种成像模式是该显微镜在
生物医学研究领域的常用模式。透射光模式包括亮视场和相差，而
反射照明的主要模式为荧光显微镜术。
