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荧光显微镜下观察细胞伤损实验-显微镜测定技术




来源:yiyi
时间:2017-3-16 17:22:16

荧光显微镜下观察细胞伤损实验-显微镜测定技术


细胞损伤实验荧光滤片,在荧光显微镜下观察。
  无论从生物学或实用目的的角度出发,研究细胞损伤需要一些方法
,来鉴别在细胞培养或组织内常少数存在的受伤细胞。策略设计

  根据用正常不能渗透的大分子示踪剂标记细胞质的原理鉴别受伤细
胞。细胞膜破裂,示踪剂进入细胞质,然后破裂处封闭,示踪剂位于细
胞内。死细胞的细胞膜破裂后不能封闭,只要洗去全部外源性示踪剂则
不被标记。有几种细胞损伤示踪剂供选择。荧光素标记的右旋糖酐比较
便宜,不同分子质量(5000~2 000 000)的右旋糖酐均可使用。如果使
用醛固定的标本,须用结合有赖氨酸的右旋糖酐。

  如果在显微镜测定或荧光测定方面可观察到损伤示踪剂,能够鉴定
受伤细胞示踪剂的优点是已知加入和除去示踪剂的时间,如荧光素标记
的右旋糖酐。因此,可用于脉冲追踪(pulse-chase)标记方案,以便确
定细胞损伤时间的选择。白蛋白是一种很好的细胞损伤示踪剂。在动物
整体研究中,白蛋白的突出优点是高浓度时许多组织的细胞外环境保持
正常。

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