利用计数板和电子计数器计数细胞-微生物计量图像显微镜
利用计数板和电子计数器进行直接计数不能区分死活细胞,根
据活细胞能进行生长繁殖这一特点,人们设计了许多活菌计数方法
。一般是将适当稀释的样品涂布在琼脂培养基表面,培养后活细胞
能形成清晰的菌落,通过计算菌落数就可知道样品中的活菌数。若
使用专门的菌落计数器,计数结果会更精确。平板涂布和倾倒平板
均可用于活菌计数。
平板计数简单、灵敏,广泛应用于食品、水体及土壤样品中活
的细菌和其他微生物的计数,但计数结果也受一些因素的影响。若
样品中细胞聚集成团,没有有效地分散,就会导致计数结果偏低,
由于不可能绝对保证每个菌落来源于一个细胞,平板计数法得到的
结果称为菌落形成单位,CFU并不完全等同于样品中的活菌数。在
平板计数过程中,样品的稀释度控制在使每个平板上菌落数在30-3
00个范围内时,能得到较好的结果。当然,若使用的培养基不能满
足样品中所有微生物各自的营养需求,计数结果也会偏低。在使用
倾倒平板技术进行活菌计数时,若溶化的琼脂培养基温度过高,会
杀死或损伤一些对温度较为敏感的细胞,因此乎板涂布技术所得的
计数结果有时会高于由倾倒平板法获得的结果。涂布平板和倾倒平
板技术
微生物数量还可由滤膜培养法获得,首先使样品滤过一种特制
的,孔径小于细菌个体的滤膜(membranefilter),然后将滤膜置于
培养基上或浸润有液体培养基的垫状物上培养,通过计算在滤膜上
形成的菌落数就可知样品中的活菌数