悬浮颗粒-生物颗粒和大分子观察显微镜
界面对所分配物质有一定的吸附容量。对可溶性物质通常无
显著影响,而对悬浮颗粒却会产生较大量的界面吸附。因此,在分
离细胞颗粒时,事实上需考虑三相:上相、界面和下相,此时,两
相系统的分离是基于颗粒在这些相之间的选择性分配。
相必须是水性的
显然,选择合适的相系统是分配方法的关键。用于生物颗粒和
大分子分配的相系统有其特殊要求,如相必须是温和的,即必须考
虑到其水含量、离子组成、渗透压、从颗粒中洗提出物质的能力和
变性效应等因素。颗粒越大,越复杂,对环境要求也越苛刻。如蛋
白质往往能容许较广范围的pH及离子强度的变化,而细胞器则可能
对pH及盐组成有严格要求。再者,为了能够分离,这些物质又须有
不同的分配特性,即它们对两相应有不同的亲和性。
上面述及的某些因素排除了传统的含有机溶剂两相系统的应用
。这不仅是因为有机溶剂有变性作用,而且还因为在水—有机物系
统中生物颗粒和大分子几乎总是完全分布于水相而无法分离。此外
,传统相系统的液—液界面有较大的界面张力,易使脆弱的细胞结
构遭到破坏。
双水相系统可以克服上述缺点,它们是由两种不相溶的聚合物
水溶液组成。两种不同聚合物溶于一给定溶剂时会导致分相,这是
个普遍现象。分相后聚合物水溶液中水的含量达85~99%。