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液体培养基中细胞微生物培养计数分析显微镜




来源:yiyi
时间:2017-4-11 14:50:08

液体培养基中细胞微生物培养计数分析显微镜

    培养法  

  培养法取决于在一个样品设定条件的特定培养基中细胞的增殖能力
。较常用两种培养方法是较大或然数法(MPN)和平板计数法。MPN测定是
将样品在含有液体培养基的培养管中连续稀释至3倍、5倍和10倍,然后
通过观察一系列稀释样获得该微生物种群密度数量级的估计值。但是,
标准的MPN方案推荐,每个稀释样至少注入3个(较好5个)平行的培养管
。孵化后,这些培养管被划分为阳性(浑浊的——表示产生了生长现象)
或阴性(清澈——没有生长迹象)。将每个阳性管稀释液的样品与根据统
计学得出的对照表对比,并按照稀释因子进行修正得到MPN/mL。建立M
PN排列虽然工作量大但有其优势。通过仔细选择培养基,MPN方法能用
来量化具有特殊新陈代谢能力的微生物。在某种液体中驯化的微生物,
在用于平板计数的固体介质中可能不形成群落。用肉汤培养基可提高可
培养计数的复活率。

  平板计数是将已知样品(可能是mg固体或mL液体)配制成一系列缓冲
稀释液。对涂布平板而言,从稀释样品中取0.1mL转移到事先用含有所
需固体培养基浇注的培养皿上,然后,用弯成曲棍状的消毒玻璃棒,把
转移的液滴在培养皿表面均匀散开。对灌浇平板而言,将0.1mL样品或
1.0mL稀释的样品移入未使用过的培养皿,将熔化的(约45℃)培养基倒
人培养皿里。轻轻地漩涡式转动培养皿,让样品逐渐分散到整个培养基
,然后让培养基在冷却时固化。接下来的步骤对灌浇和涂布平板都是相
同的。

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