复合细胞结构层析的应用实验分析显微镜
亲和层析的应用
用这种技术所纯化的酶和其他蛋白质的数目急剧增加就
已经显示了亲和层析的巨大潜力。尤其是谷氨酞胺合成酶(一
种异构酶)一类。此外,也已纯化了很多抗原、抗体和核酸。较
令人鼓舞的特色是这种技术可能提供了研究激素和药物受体
以及其他复合的细胞结构的一种手段,而这些至今证明是十
分困难的。
在实验室和工业生产的实用生物化学中日益显得重要的
一种技术是所谓固相酶的使用。如同亲和层析那样,它是把
一种酶通过共价的结合,固定到一种不溶性的基质上,使它具
有了游离的酶所没有的一些特殊的优点。被固定的酶增加了
对热和蛋白水解酶的稳定性,并且能装到柱里。在这种条件
下,当一种适当的底物溶液通过柱时,仍然能催化它的正常
反应,而得到一个没有酶的产物,而留下的酶还可进一步使
用。另一种情况,在杯式操作中,不溶性的酶可以通过过滤或
离心来回收,而又不会失去其活性。在不溶性酶中所进行的
反应与亲和层析中所谈到的十分类似。
高压液体层析
市场上供应的仪器,较近已发展了可在高压下,通常用柱
层析法来进行化合物的分离。细钢管中装有固定相,移动的
液相用泵在压力下通过柱。因此,柱可以做得比通常使用的
长得多,并且往往显著地缩短了分离的时间。在这些条件下
也能应用吸附、液一液分配、离子交换和凝胶通透层析的原理,
因此这种技术的用途是很广的。这种仪器通常附有一个或多
个检测系统,能连续地监测从柱上流出的洗脱液。