生物实验-高分子化合物的混合物电泳的应用
电泳的应用
电泳技术可以用于带净电荷分子的分离。低压纸电泳已
广泛地用于氨基酸、多肤、蛋白质、核普酸、核酸以及带电碳水
化合物衍生物的分离。但是,小分子在纸上进行低压电泳时
会发生明显的扩散。对小分子要得到更好的分离,一般使用
高压电泳,因为分离所需要的时间较短,因此分子扩散较小。
醋酸纤维素在某种程度上已取代了纸作为支持介质。高纯度
的醋酸纤维素对样品的吸附作用要比纸小,因此对样品成分
能得到较好的分辨率。醋酸纤维素还有一个优点,即由于支
持介质染色的本底较浅,而能更好的显示各种成分。酷酸纤
维素电泳在临床上已广泛地用于分离血清蛋白(包括塘蛋白
和脂蛋白)和血红蛋白,并且也用于免疫电泳。纸层和薄层高
压电泳都能用于分离由于各种代谢紊乱而有可能以高浓度存
在于血浆和尿中的氨基酸。薄层电泳对于分离氨基酸和核昔
酸一类较小的分子特别有用,因为它分离迅速,具有好的分辨
率,并且由于它可用于双向分离,所以可以进行蛋白质和核酸
水解物的“指纹图谱”分析。薄层电泳也可用于胺类、茶酚类、
酚类和无机离子的分离。
凝胶作为电泳分离的支持介质,大大地扩大了这种技术
的使用范围。聚丙烯酞胺一类凝胶的孔径可以选择,以促使
带有相同电荷,但具有不同大小和形状的分子的分离,这是一
个很大的优点。因此,凝胶电泳非常适合于核酸(特别是RNA
分子)和蛋白质(包括酶、同功酶和结构蛋白)混合物的分离。
淀粉和琼脂凝胶的孔径不像聚丙烯酚胺那样熊被控制,但是,
这些凝胶已发现在分离高分子化合物的混合物中是有用的。
等电聚焦和等速电泳在分析水平上具有很好的分辨率,
但是,与幕式电泳一样更适用于制备工作。这些技术能用于
分离较大量的物质,并且在分离结束后能回收这些物质。多
肚、蛋白质、核普酸等已用这些技术进行了成功的分离。