实验室分光光度计与显微分光光度计-光学仪器
显微分光光度计:它用一种很窄的单色辐射束与显微镜系统相联。这种仪器能测定单个活细胞内不同部位的消光。
应用 大多数实验室分光光度计的较一般的用途是作为优质比色计,即作为光度计用以测量在颜色反应中产生的生色团的量。后面即将介绍这项技术以及分光光度法比较经典的用法。
比色测定法:许多物质在可见光区的消光系数微不足道,它可以与某些别的试剂定量地反应而生成有色产物。这种性质可以作为分析这些物质的基础。颜色是在标准条件下从这种物质的已知量产生的(生色团),并且测定这些样品的消光,用含有除被测物质以外的全部试剂的参考杯作为试剂空自。用这个空白通过变化狭缝宽度使消光读数至零。测量的消光对应产生颜色的测试物质的量或浓度制图。这个图谱叫做校准曲线。然后物质的未知量可以通过在同样标准条件下产生的颜色,测量其消光并用校准曲线来决定产生该消光的物质的量来测定。因为用比较少量的物质常常能够产生比较高的消光,所以比色测定法普遍应用于生物化学,来分析广泛范围的生物学重要分子。
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