疫荧光法切片的显微镜观察标本结构清晰度
(1)甘油:甘油(glycerin)作为封固剂多用于运动终板、脂肪
、类脂质等标本的封片,既可以采用稀释的甘油封片,也可以使用
纯甘油封片。纯甘油除了可对标本封片外,同时还具有对标本的防
腐作用,因为甘油本身具有吸水性。由于甘油的折光率(1.473)低
于组织标本的折光率(1.53~1.54),所以封固后的组织细胞在光
镜下观察时,其清晰度不是很好。因此,甘油封片的组织切片通常
是在低倍光镜下观察的。
(2)液状石蜡:液状石蜡(1iquid paraffin,石蜡油paraffino
il)是石油化工的一个产品,其内杂质含量较少,折光率为1.471
,多数情况下使用在整体标本的封固方面。另外,由于液状石蜡很
少引起非特异性荧光反应,因此也用于免疫荧光法切片的封固。
(3)新型水溶性封固剂:一种人工合成的新型封固剂,其较大
的特点是:封固时不需要盖玻片,封固剂为水溶性的液体,但封固
后则在标本表面凝固为透明薄膜,如ClearmountTM。适用于石蜡切
片、冰冻切片以及不能进行乙醇脱水的组织染色。
2.固体封固剂 甘油一明胶(glycerin-jelly)为固体封固剂
,现在已不常使用了,某些实验室会在脂肪染色、组织化学的某些
酶类染色以及部分免疫组化染色后使用。甘油一明胶的折光率较纯
甘油的折光率要高一些,因此光镜下标本结构的清晰度也有所提高
。与其他水溶性封固剂不同的是其封固后具有一定的凝固性,这是
由于明胶的熔点(约65~70℃)要高于室温的缘故。
也小,只是封固切片的凝结时间要相对延长,一般需要3~6个月,
但凝结后的切片坚硬牢固,不怕磨损。随着时间的推移,切片内树
胶氧化(日光、灯光照射)逐渐变成黄色,同时也伴随组织颜色的
减退。