细胞的定量测定图像分析软件-倒置图像显微镜
为细胞生长而维持正确的生理学条件的方法有关,而不是主要
改变培养容器的设计。单层细胞培养系统(贴壁依赖细胞)在单位系
统中大规模的培养是很困难的,但与多次重复操作不同,现在已经
发展了广泛的各种培养系统。其目的是增加为细胞可利用的表面面
积,此面积与培养液和成功到达总培养的体积有关。
细胞培养更为综合的方面是首先要先讨论的,这样才更能理解
这些技术操作方法。
一般方法和培养参数
熟悉某些生物学概念和方法是着手大规模细胞培养的基础。在
小规模培养中,经常存在偏差导致某些错误。如果培养失败是扫兴
的,但不一定会在时间和用费上造成大损失。在大规模细胞培养中
,由于培养范围扩大也就表示投资者人力物力的更大增加。培养失
败就会相当严重,而同时培养系统会进一步要求更严格地遵守所有
的条件。在这一部分是讨论整个·大规模细胞培养系统的基本要素
,如果培养容量还要增大,或培养的设计和操作要改变时,必需要
注意上述要素。
细胞的定量测定
测定细胞总数(用血细胞计数器计数整个细胞数或染色细胞核
数),以及细胞总量(检测细胞蛋白质总量或干重),都是容易做到
的。但测定细胞活性比较困难,因为所使用的方法是用对细胞产生
应激反应来测定一个特异而非经典的细胞生理学参数。另外的困难
是很多培养系统不能取到细胞样品(大多数属贴壁依赖细胞),或不
能用肉眼检查,因而必需进行非直接的测定。