动物细胞培养器材和生长-倒置显微镜的应用
培养容器和生长表面
为动物细胞生长不会丢弃的标准材料是玻璃,虽然在较大规模
培养中玻璃可以用不锈钢代替。使用硅硼酸盐玻璃材料仍是更为可
取,因为它与钠玻璃相比没有碱性,而且耐操作,高压灭菌较好。
玻璃器皿的基本要求是完全洗净后,要用双蒸水冲洗3次。细胞可
迅速在玻璃基质上贴壁。如果需要,为细胞的贴壁生长可增加各种
培养表面的处理。在悬浮培养中要阻止细胞贴壁,必需用硅制剂专
利药物处理。
要使用不锈钢构成的复杂系统及硅管与各种系统的组成部分相
连。硅管是很易透气的,因此当转移溶养液时会丢失C02而产生了
问·题。硅管在使用蠕动泵时,也容易迅速磨损。因此,应该使用
附加的结实的厚壁管子。当接连硅管与不锈钢管子时,要用塑料绳
捆住稳固好以防止在高压或使用培养系统时,由于回流压力的增加
而脱开。不锈钢管末端要加上硅管顶端以防止擦碰培养容器或引起
细胞的机械损伤。习惯用的连接器,通常在操作过程中,应该保证
与附件容器能很好地无菌结合(来自所有发酵器供应公司的连接器
都是可利用的)。 ·
经常间隔安全取出培养物是很重要的。进口处加一个疫苗瓶塞
,提供插入一个皮下注射器取样是一千简单的办法,但这只适合小
量培养,而且反复刺入疫苗瓶塞会导致整个培养物丢失。因此推荐
使用发酵器公司供应的专门取样装置是有效的。这些取样装置能自
动清除管道内含有死细胞的静止培养液,因而无需丢弃较初取出的
少量样品而增加保持无菌的机会。