利用荧光显微镜检测荧光标记物-细菌显微镜
荧光抗体法
荧光抗体法(fluorescent antibody,FA)自1942年创立发展以来,广
泛地应用于医学诊断和食品微生物检测。特定抗原的抗体与荧光物质相结
合而发出荧光,当抗体与抗原发生反应时,抗体一抗原复合体发出荧光,
利用荧光显微镜检测。荧光标记物通常是:罗丹明B(Rhodamine B)、荧光
异氰酸盐和荧光异硫代异氰酸盐;荧光异硫代异氰酸盐应用最为广泛。荧
光抗体(FA)技术可以采用两种基本的方-法:直接法是利用抗原与特异的带
有荧光物质抗体结合;间接法中同源抗体不与并不与荧光物质结合,而是
利用同源抗体的抗体(抗抗体)与荧光物质相连(抗原被同源抗体包围,同源
抗体又被其抗抗体包围,从而发出荧光)。在间接法标记物可以检测同源抗
体的存在,直接法中标记物检测抗原的存在。利用间接法不需要为每一待
检的微生物制备荧光抗体。如果使用H免疫血清,FA技术就不需要沙门氏菌
的春培养物。最常用的共价是多价沙门氏菌OH球蛋白,用荧光异硫代氰酸
盐标记用来检测A~Z组菌体抗原。由于沙门氏菌抗血清体可以与其他相关
微生物发生反应,(例如:亚利桑那菌(A—zo”以)、柠檬酸杆菌(Citrobac
ter)、大肠杆菌(E.coli))。
因此,当检测自然污染食品时会出现假阳性的结果。CherrY和Moody[
州综述了FA技术在医学微生物的应用;