液体培养基氨基酸的检测浊度测定分析仪器
液体培养基中产生的氨基酸的检测
微生物学测定法
液体培养基中氨基酸产生菌的检测，通常要比琼脂平板上脚检测
花费更多的时间，付出更大的劳动。菌种的分离按前述方法从天然来
源中分离。从平板上挑取单个菌落，培养于各自的琼脂，斜面内。斜
面菌种长成后，接种到通常由丰富的营养成分混合组成的液体培养基
内。种子培养基用于获得在生理上处于氨基酸产生期的菌种。通常按5
g6的体积比，将种子培养物接种到发酵培·养基中。除非特殊的情况
另有不同的要求，接种菌种的发酵培养·基，一般于28～3了℃培养3
～5天。测定时，吸取5～10毫升杆·晶，首先让其暴露于流动的气流
中约10分钟，以便使游离细胞内的氨基酸释放出来。然后，将样品冷
却并离心，陈去细胞及其他悬浮的固形物，上清液供测定用。
(1)方法I 浊度测定法
利用浊度法以及下面介绍的滴定法测定液体培养物时，要求样品
中不含有培养物内的菌体细胞，将样品通过为使液体灭菌而设计的微
生物过滤器，来除去细胞。
例如，当测定赖氨酸等样品时，要求将过滤好的培养液，按逐步
增加的体积(o～3毫升)加到三只为一组的清洁的无菌试管中，每只试
管盛有3毫升的二倍浓度的赖氨酸测定培养基。然后，用无菌蒸馏水将
体积增加到6毫升。将不接入菌种的发酵培养基与含有15微克／毫升赖
氨酸测定培养基相混合，组成对照样品。其后的操作步骤也按上述同
样步骤处理。所有试管都接种入一滴赖氨酸测定用的标准菌种肠膜状
明串珠菌ATCC 8042号菌株。将试管于37℃保温16～23小时，在此期间
测定菌体的生长。
由菌体生长产生的细胞密度或浊度，取决于样品中存在的赖氨酸
的数量。已知样品的浊度(光密度或OD)对赖氨酸浓度作图，基本上得
到一条直线。人们可以用它由相应的光密度读数求出未知样品中赖氨
酸的含量。
(2＼方法Ⅱ 滴定法
滴定法测定氨基酸所作用的技术，基本上与浊度测定法所使·用
的技术相类似。两者主要的区别在于测定反应的方式不同。在浊度测
定法中，根据光吸收或浊度的变化来检测测定用菌种对氨基酸的反应
，而在滴定法中，根据生理反应的变化，特别是酸的产生来进行测定
。肠膜状明串珠菌ATCC 8042菌株可由葡萄糖‘产生酸，其产生速度主
要取决于测定培养基中赖氨酸的浓度。
