细菌的细胞壁组分在细菌气相层析实验显微镜
气相层析法测定代谢酸产物
厌氧菌的终末代谢产物有挥发性脂肪酸、非挥发性脂肪酸、醇类等
,患有这些代谢产物的样品中各个组分的沸点、极性等不同。样品被气
化后由载气带带入层析柱中进行分析时,各组分就在两相之间(气相和
液相)反复分配(即吸附-洗脱)。由于层析柱中固定相对各组分的吸附
情况不同,因此各组分在层析柱中的运行速度也不同,彼此分离,有序地
离开层析柱进入检测器,各组分的保留时间和出峰顺序也不同。根据层
析峰出峰顺序、保留时间可以确定组分中物质的种类,根据层析峰面积
和大小可以确定组分中物质的含量。气相层析法测定代谢产物的具体
方法是:将待测细菌接种于PYG培养基中,于37℃厌氧培养24~48小时,将
培养物制成挥发性或非挥发性脂肪酸样品,按仪器型号要求取1~4μL样
品注入,进行气相分析。
高效液相层析法测定代谢酸产物高效液相层析法又称高效液相色
谱法(HPLC),是在经典液相层析法基础上和气相层析理论的基础上发展
起来的,由于其分离能力强、测定灵敏度高并可在室温下进行,因此在
口腔医学的研究中也开始得到广泛应用
细菌细胞壁和细胞膜组分分析
细菌的细胞壁和细胞膜组分在细菌的种系发生上占有特殊的地位,
通过分析这些化学组分可进行细菌的分类和鉴定。
全细胞水解物组分分析全细胞水解产物的组分分析主要包括分析
一些存在于细胞壁的高分子化学组分,如二氨基庚二酸的异构物及阿拉
伯糖等。该法简单能迅速获得结果,在放线菌及其他革兰阳性的杆菌的
分类和鉴别上很有意义。、纯细胞壁制备的组分分析
(1)纯细胞壁的制备收集适当培养调价下生长的细菌细胞,破碎细胞
壁,通过酶解不同速度离心去掉杂质,得到纯的细胞壁制备物。
(2)纯细胞壁的组分分析将收集的纯细胞壁脱水后用酸水解,再用纸
层析或薄层层析其中的胞壁糖和氨基酸等组分。
