直接镜检法由于各类细菌培养基分析显微镜
采用目镜计数网计算
此法一般不必把水样稀释,只将一定量的水样涂开,染色放在油镜下
直接观察,若采用染色法可区别死活孢子,可计数活孢子,比应用平板培
养法计数活孢子来得快捷,在实用上有一定价值。操作步骤如下:
(1)用蜡笔在4片载玻片中段划边长为2或厘米的止方形,即面积为4或1
平方厘米。
(2)分别用4支无菌移液管吸四种水样各0.01毫升置于玻片正方形中,
涂满整个正方形面积然后按单染色法,用石炭酸复红染色剂或草酸铵绪
晶紫染色
(3)将染色片放于油镜下观察:计算出目镜计数网中每小格的平均菌落
。用测微尺标定目镜计数网格在视野中的边长。
超滤膜直接镜检法由于各类细菌不能在一种培养基上长出,上述所
计算的,虽然是活菌,但所计算的菌数可能偏少。超滤膜直接镜检法可
用来计算水样中的各种细菌的总数。可是包括了死细菌,故其数量可能
偏高,操作方法如下:
(1)滤膜处理,超滤器的安装,抽滤方法同上法
(2)用无菌移液管吸5.0―10.0毫升水样,注入直径为10毫米的小滤器(
能滤过细菌),加3-5倍量的无菌水稀释,使菌体分散均匀,然后将过滤的
稀释水样放于超滤器抽滤浓缩,若水样是海水,须加少量无菌蒸馏水,再
抽滤除去膜上的盐分
(3)用石炭酸藻红或吕弗氏美蓝,按前法将滤膜染色,可区别滤膜上的
菌体与无机颗粒,后者染色较深,而菌体清晰。
