荧光立体显微镜细菌单细胞分辨率分析显微镜
荧光立体显微技术
荧光立体显微镜对细菌单细胞的分辨率很低,因此在微生物学研究
中的应用并不广泛。但是,荧光立体显微镜能够对植物表面的微生物集
落进行有用的初步观察研究,例如生物膜和真菌,或者为分辨率的显微
镜观察选择组织样品。例如,
在荧光立体显微镜下观察到这些现象是可能的,这是因为大的细菌
细胞聚合体所发出的高亮度的绿色荧光,而在绿光范围内在苜蓿芽的其
他部位仅有相对很少的自身背景荧光。
免疫电子显微镜
尽管在细胞成像中光显微技术发挥着重要的作用,然而荧光显微镜
的分辨率仍然低于电子显微镜(EM)。可是,扫描电子显微镜(SEM)研究
显示,植物表面的生物膜是嵌在有机物质上的多种异种微生物的复杂集
合体。对于研究者而言,令人失望的是电子显微镜下的植物上的绝大部
分细菌细胞仍然是未知的。幸运的是,免疫电镜的胶体金标记技术为自
然环境中特定微生物的检测和揭示微生物细胞更为复杂的生物学现象
提供了新的研究手段。胶体金标记技术的优点在于将分子原位定位的
高特异性与扫描电镜的高分辨率结合起来,故在植物病理学研究中得到
了广泛的应用。血清型的高分辨率的显微成像。更重要的是,对鞭毛组
分进行免疫检测使研究者能观察到沙门菌 Thompson血清型的鞭毛是锚
定在叶面上,这表明鞭毛的作用是使细胞黏附于植物(图26.9)。除了免
疫细胞化学外,研究者根据凝集素、酶和蛋白质等对特定分子结合的特
异性开发了很多其他的细胞化学研究方法来用于电子显微镜的金标记
。
